彩色SDS-PAGE凝膠試劑盒
產(chǎn)品簡介： 本產(chǎn)品將傳統(tǒng)凝膠配置過程進行了優(yōu)化，采用上層膠和下層膠的預(yù)混配方，加入新型促凝劑即可凝膠，快速簡捷。該產(chǎn)品的上層膠為淡紅顏色，點樣孔辨識度高，便于點樣。本產(chǎn)品即適用于傳統(tǒng)凝膠制備，也適用于一步法凝膠制備 ,助力高效完成科研實驗。
產(chǎn)品特點： 無需繁瑣計算，按步驟快速制備凝膠。
淡紅色上層膠，膠孔辨識度高，易于加樣。
無需使用TEMED，無惡臭刺鼻氣味。
保存條件： 常溫運輸，短時間可在室溫下保存，2個月。 長期保存放4度冰箱，12個月
實驗步驟： 以實驗室常用使用Bio-Rad Mini 1.0mm厚10%凝膠配制為例
傳統(tǒng)二步法制膠步驟如下：
（一）下層膠配制：
1. 取等體積的下層膠溶液和下層膠緩沖液各 2.5ml，混勻。
2. 吸取80ul新型促凝劑加至上述混合液中，混勻。
3. 將上述配制好的混勻液加入制膠板內(nèi), 加入適量的水覆蓋與下層膠上，壓平下層膠， 觀察當(dāng)水和膠之間有一條折射線時，說明膠已凝固（約20分鐘左右），棄去上層水，用濾紙吸盡多余的水。
（二）上層膠配制
1. 取等體積的上層膠溶液和彩色上層膠緩沖液各0.75ml，混勻。（注意：使用前請搖勻）。
2. 吸取30ul新型促凝劑加至上述混合液中，混勻。
3. 將上述配制好的混勻液加入制膠板內(nèi),插入梳齒。
4. 待上層膠凝固后（20分鐘左右），取出梳子，完成凝膠制備過程。
|
下層膠配方 |
|
上層膠配方 |
||||||
|
凝膠厚度 |
下層膠溶液 |
下層膠緩沖液 |
新型促凝劑 |
凝膠厚度 |
上層膠溶液 |
上層膠緩沖液 |
新型促凝劑 |
|
|
0.75 mm |
2.0 ml |
2.0 ml |
80 ul |
0.75 mm |
0.5 ml |
0.5 ml |
80 ul |
|
|
1.0 mm |
2.5 ml |
2.5 ml |
80 ul |
1.0 mm |
0.75 ml |
0.75 ml |
80 ul |
|
|
1.5 mm |
4.0 ml |
4.0 ml |
80 ul |
1.5 mm |
1.0 ml |
1.0 ml |
80 ul |
|
一步法制膠步驟如下：
1. 取等體積的下層膠溶液和下層膠緩沖液各 2.5ml，混勻。
2. 取等體積的上層膠溶液和彩色上層膠緩沖液各0.75ml，混勻。（注意：由于紅色顏料的理化性質(zhì)，使用前請搖勻）。
3. 向步驟1的混合溶液中加入80μL 的新型促凝劑，混勻。將混勻后的溶液注入制膠玻璃板內(nèi)，使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長0.5 cm即可
（注意：此溶液為過量，請勿全部注入）。
4. 向步驟2的混合溶液中加入30μL的新型促凝劑，輕柔混勻，無需等待下層膠凝固，即可將混勻后的溶液輕緩注入制膠玻璃板中，插入梳齒。(注意：灌注上層膠溶液一定要輕緩，避免將上層膠溶液沖入下層膠液中）。
5. 待上層膠凝固后（20分鐘左右），取出梳齒，完成凝膠制備過程。
(注意：膠凝固后，上下層膠分界線平整度弱于常規(guī)兩步法配制的膠，但對電泳沒有影響）
注意事項： 1. 接觸皮膚或眼睛請立即用大量清水沖洗，丙烯酰胺有神經(jīng)毒性，請戴橡膠手套操作。
2. 凝膠速度與溫度有顯著的正相關(guān)性。溫度越高，凝膠速度越快，室溫過高時建議適當(dāng)減小新型促凝劑的用量；室溫較低，可適當(dāng)延長凝膠時間；
3. 室內(nèi)濕度較低時可能導(dǎo)致水蒸發(fā)過快使加樣孔高度降低，避免長時間放置。
4. 新型促凝劑室溫長時間放置會失效，實驗完成后放4度冰箱備用，但時間不超過2個月。
暫無參考文獻！
